- 42±1
- 37±1
- 35±1 (+)
- 22±1
Правильный вариант — 35±1 °C. Для диско-диффузионного метода это стандартный температурный диапазон, при котором рост большинства клинически значимых бактерий и диффузия антибиотика в агаре обеспечивают воспроизводимое формирование зон задержки роста. Полученные диаметры зон затем сопоставляют с действующими клиническими пограничными значениями чувствительности.
Обычно используют агар Мюллера—Хинтона, стандартизованную бактериальную суспензию, соответствующую 0,5 по стандарту Мак-Фарланда, и равномерный газон культуры. Чашки инкубируют в аэробных условиях, как правило, 16–18 часов; для отдельных микроорганизмов и комбинаций антибиотик—возбудитель могут применяться специальные условия, предусмотренные EUCAST или CLSI. Отклонение температуры способно изменить скорость роста бактерий и размеры зон ингибиции, что приводит к ошибочной интерпретации результата.
Температура 37±1 °C близка к физиологической, но не является базовой для стандартного диско-диффузионного тестирования: ускорение роста может уменьшать зоны задержки и смещать категорию чувствительности. При 22±1 °C рост многих патогенов недостаточен, а 42±1 °C подавляет развитие значительной части клинически значимых бактерий. Поэтому для рутинного исследования применяют именно 35±1 °C, если методическими документами для конкретного микроорганизма не установлено иное.
| Параметр | Стандартное значение | Практическое значение |
|---|---|---|
| Питательная среда | Агар Мюллера—Хинтона | Обеспечивает воспроизводимую диффузию антибиотиков и рост большинства не требовательных бактерий |
| Температура инкубации | 35±1 °C | Базовый режим для получения сопоставимых диаметров зон задержки роста |
| Посевной материал | Суспензия 0,5 по Мак-Фарланду | Предотвращает влияние слишком высокой или низкой бактериальной нагрузки на размер зоны |
| Инокуляция | Равномерный газон по поверхности агара | Позволяет корректно измерить диаметры зон ингибиции |
| Расположение дисков | Соблюдение расстояний между дисками и от края чашки | Предупреждает слияние зон и искажение результатов |
| Атмосфера | Обычно аэробная | Для требовательных микроорганизмов применяют специальные газовые условия |
| Продолжительность | Чаще 16–18 часов | Считывание проводят после полноценного роста контрольной культуры |
| Интерпретация | Сопоставление диаметра зоны с EUCAST или CLSI | Результат классифицируют как чувствительный, чувствительный при увеличенной экспозиции или резистентный — в зависимости от применяемого стандарта |