2) метиленовым синим
3) по Граму (+)
4) щелочным синим Леффлера
Правильный ответ — 3) окрашивание по Граму. Оно не относится к простым методам, поскольку является дифференциальным: включает последовательное нанесение кристаллического фиолетового, раствора Люголя, обесцвечивание спиртом или спиртово-ацетоновой смесью и дополнительное окрашивание фуксином или сафранином. В результате грамположительные бактерии сохраняют фиолетовую окраску благодаря формированию прочного комплекса краситель–йод в толстом слое пептидогликана, а грамотрицательные становятся бесцветными на этапе обесцвечивания и окрашиваются контрастным красителем в розово-красный цвет.
Фуксин Пфейффера, метиленовый синий и щелочной синий Леффлера применяют для простого окрашивания: используется один основной краситель, который позволяет оценить форму, размеры, взаимное расположение клеток и наличие скоплений микроорганизмов. Эти методы удобны для ориентировочной микроскопии, однако не дают полноценной дифференциации бактерий по строению клеточной стенки.
| Метод окрашивания | Тип метода | Основной краситель | Что позволяет определить |
|---|---|---|---|
| Метиленовый синий | Простой | Метиленовый синий | Форму, размеры и расположение бактериальных клеток |
| Фуксин Пфейффера | Простой | Разведённый водный фуксин | Общую морфологию и скопления микроорганизмов |
| Щелочной синий Леффлера | Простой | Щелочной метиленовый синий | Контуры клеток и особенности их расположения |
| По Граму | Дифференциальный | Кристаллический фиолетовый и контрастный краситель | Разделение бактерий на грамположительные и грамотрицательные |
| По Цилю—Нильсену | Дифференциальный | Карболовый фуксин, кислота, метиленовый синий | Выявление кислотоустойчивых микобактерий |