2) осмотическим давлением в клетке
3) особенностями структуры клеточной стенки (+)
4) особенностями красителя
Правильный ответ — 3) особенностями структуры клеточной стенки. При окраске по Граму диагностическое значение имеют прежде всего толщина и организация пептидогликана, а также наличие наружной мембраны. У грамположительных бактерий пептидогликановый слой многослойный и толстый, поэтому комплекс кристаллический фиолетовый — йод сохраняется после обработки спиртом или ацетоном. Клетки остаются фиолетовыми.
У грамотрицательных бактерий пептидогликан тонкий, между ним и цитоплазматической мембраной имеется периплазматическое пространство, а снаружи расположена наружная мембрана с липополисахаридом. При обесцвечивании липиды наружной мембраны растворяются, комплекс первичного красителя удаляется, и после нанесения контрастного красителя клетки приобретают розово-красную окраску. Следовательно, результат определяется не осмотическим давлением и не специфическими свойствами красителя, а структурными особенностями клеточной стенки и оболочек бактерии.
| Признак | Грамположительные бактерии | Грамотрицательные бактерии | Значение для окраски по Граму |
|---|---|---|---|
| Пептидогликан | Толстый, многослойный | Тонкий, обычно 1–2 слоя | Определяет удержание комплекса основного красителя |
| Наружная мембрана | Отсутствует | Присутствует | При обесцвечивании повышает проницаемость оболочки |
| Основные компоненты оболочки | Пептидогликан, тейхоевые и липотейхоевые кислоты | Тонкий пептидогликан, наружная мембрана, липополисахарид | Обусловливают различия в проницаемости и фиксации красителя |
| Цвет после обесцвечивания и контрастирования | Фиолетовый | Розовый или красный | Используется для дифференциации бактерий |
| Примеры | Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Bacillus | Escherichia coli, Neisseria meningitidis, Pseudomonas aeruginosa | Морфологическая и ориентировочная таксономическая характеристика |
| Особые случаи | Стареющие культуры могут окрашиваться грамвариабельно | Некоторые виды плохо окрашиваются стандартным методом | Результат зависит от возраста культуры, метода фиксации и качества обесцвечивания |