2) Шукевича
3) Аппельмана
4) диско-диффузный (+)
Правильный ответ: диско-диффузный метод. Это стандартизированный фенотипический способ определения чувствительности бактериального изолята к антибактериальным препаратам. На поверхность агаровой среды, обычно агара Мюллера—Хинтона, равномерно наносят микробную суспензию заданной плотности, соответствующей стандарту 0,5 по Мак-Фарланду, после чего размещают бумажные диски с фиксированным содержанием антибиотиков.
Во время инкубации препарат диффундирует из диска в питательную среду и подавляет рост чувствительных бактерий. Вокруг диска формируется зона ингибирования, диаметр которой измеряют в миллиметрах. Полученный результат сопоставляют с актуальными пороговыми значениями EUCAST или CLSI, после чего микроорганизм относят к категории чувствительного, чувствительного при увеличенной экспозиции либо резистентного. Метод не позволяет непосредственно определить минимальную подавляющую концентрацию, однако широко применяется благодаря доступности, воспроизводимости и возможности одновременно исследовать несколько антибиотиков.
Методы Дригальского и Шукевича предназначены для решения других бактериологических задач: распределения посевного материала по поверхности среды и выделения подвижных микроорганизмов соответственно. Метод Аппельмана традиционно связан с титрованием бактериофагов методом последовательных разведений, поэтому перечисленные способы не являются стандартными методами оценки антибиотикочувствительности.
| Метод | Основное назначение | Принцип | Оцениваемый результат |
|---|---|---|---|
| Диско-диффузный | Определение чувствительности бактерий к антибиотикам | Диффузия антибиотика из диска в агар с посеянной культурой | Диаметр зоны ингибирования роста в миллиметрах |
| Серийных разведений | Количественная оценка активности антибиотика | Исследование роста бактерий при последовательном снижении концентрации препарата | Минимальная подавляющая концентрация — МПК |
| Дригальского | Получение изолированных колоний | Распределение материала по поверхности плотной питательной среды | Рост отдельных колоний для последующей идентификации |
| Шукевича | Выделение подвижных бактерий, в частности протея | Использование способности микроорганизма распространяться по поверхности среды | Получение преимущественного роста подвижной культуры |
| Аппельмана | Определение титра бактериофага | Последовательные разведения фага в жидкой среде с чувствительной культурой | Наибольшее разведение, при котором сохраняется лизис бактерий |
Практический вывод: для корректной антибиотикограммы необходимо стандартизировать плотность инокулюма, состав и толщину агара, содержание антибиотика в дисках, условия инкубации и интерпретировать зоны подавления роста только по действующим клиническим критериям.