2) 5 мм
3) 1 см
4) 7 мм
Правильный ответ: 4 мм. При диско-диффузионном определении чувствительности бактерий к антимикробным препаратам используют стандартизированный слой агара Мюллера–Хинтона толщиной около 4 мм. Такая толщина обеспечивает воспроизводимую диффузию действующего вещества из диска в питательную среду и позволяет корректно сопоставлять диаметр зоны задержки роста с установленными интерпретационными критериями. В методике EUCAST регламентирована глубина агара 4,0 ± 0,5 мм.
Отклонение толщины среды является значимым источником лабораторной ошибки. В чрезмерно толстом слое антимикробный препарат распространяется медленнее, поэтому зоны подавления роста могут уменьшаться, создавая риск ложного заключения об устойчивости микроорганизма. При слишком тонком слое зоны, напротив, увеличиваются, что может привести к ошибочной оценке изолята как чувствительного. Поэтому при приготовлении чашек контролируют не только толщину агара, но также его состав, pH, влажность поверхности, плотность инокулюма и режим инкубации.
Основные параметры стандартизации диско-диффузионного метода
| Контролируемый параметр | Стандартное требование | Значение для результата | Возможная ошибка при отклонении |
|---|---|---|---|
| Толщина агарового слоя | Около 4 мм | Обеспечивает стандартную скорость диффузии препарата | Изменение диаметра зон подавления роста |
| Питательная среда | Агар Мюллера–Хинтона для большинства бактерий | Обеспечивает воспроизводимый рост и диффузию | Несопоставимость результатов с нормативными критериями |
| Плотность инокулюма | Стандартизированная бактериальная суспензия | Формирует равномерный бактериальный газон | Слишком густой посев уменьшает зоны, редкий — увеличивает |
| Поверхность среды | Ровная, без избыточной влаги | Предотвращает растекание инокулюма и препарата | Нечёткие, деформированные или сливные зоны |
| Размещение дисков | Равномерное, с достаточным расстоянием | Исключает взаимное перекрытие зон | Невозможность точного измерения диаметра |
| Инкубация | Стандартизированные температура, атмосфера и продолжительность | Обеспечивает правильное проявление фенотипа чувствительности | Ложная чувствительность или устойчивость |
| Учёт результата | Измерение полного диаметра зоны в миллиметрах | Позволяет классифицировать изолят по действующим критериям | Ошибочная клиническая интерпретация антибиотикограммы |