2) Граму (+)
3) Бури-Гинсу
4) Ожешко
Правильный ответ: 2) по Граму. Окраска по Граму является основным универсальным методом первичной дифференциации бактерий. Она основана на различиях в строении клеточной стенки: у грамположительных микроорганизмов толстый слой пептидогликана удерживает комплекс генцианового фиолетового с йодом, поэтому клетки окрашиваются в сине-фиолетовый цвет. У грамотрицательных бактерий пептидогликановый слой тонкий, а наружная мембрана при обесцвечивании спиртом разрушается; после докрашивания фуксином или сафранином клетки приобретают розово-красную окраску.
Окраска по Цилю—Нильсену предназначена преимущественно для выявления кислотоустойчивых бактерий, прежде всего микобактерий. Метод Бури—Гинса используют для негативного окрашивания и выявления капсул, а метод Ожешко — для обнаружения бактериальных спор. Таким образом, для общей ориентировочной характеристики большинства клинически значимых бактерий применяют окраску по Граму, после чего при необходимости используют специальные методы и биохимические тесты.
| Метод окраски | Основной объект выявления | Механизм или особенность | Результат и практическое значение |
|---|---|---|---|
| По Граму | Грамположительные и грамотрицательные бактерии | Различия в толщине пептидогликанового слоя клеточной стенки и способности удерживать основной краситель после обесцвечивания | Грамположительные клетки — сине-фиолетовые, грамотрицательные — розово-красные; используется как основной метод первичной дифференциации |
| По Цилю—Нильсену | Кислотоустойчивые бактерии, главным образом микобактерии | Клеточная стенка содержит большое количество миколовых кислот, препятствующих обесцвечиванию кислотно-спиртовым раствором | Кислотоустойчивые бактерии окрашиваются в красный цвет на синем фоне; применяется при диагностике микобактериальных инфекций |
| По Бури—Гинсу | Бактериальные капсулы | Используется негативное окрашивание фона тушью с последующим окрашиванием клеточного тела | Капсула выглядит как светлый, неокрашенный ободок вокруг клетки; метод важен для выявления капсулообразующих микроорганизмов |
| По Ожешко | Эндоспоры бактерий | Предварительная обработка и окрашивание позволяют выявить структуры, устойчивые к проникновению обычных красителей | Споры визуализируются отдельно от вегетативных клеток; метод применяют при изучении спорообразующих бактерий родов Bacillus и Clostridium |