- транспортировке материала при низкой температуре
- вырезки материала (+)
- переохлаждение формалина
- потере формалином фиксирующих свойств
Правильный ответ: вырезка материала. Артефакты сдавления и размозжения формируются при механической обработке биоптата или операционного материала, когда ткань чрезмерно сжимают пинцетом, зажимом, кассетой либо проводят грубое рассечение тупым или неправильно заточенным лезвием. В результате нарушается архитектоника ткани, клетки деформируются, ядра приобретают неправильную форму, цитоплазма смещается или разрывается, а границы между тканевыми структурами становятся нечеткими.
Особенно чувствительны к этому мягкие и рыхлые ткани, слизистые оболочки, жировая ткань, опухолевые фрагменты и биоптаты небольшого размера. При микроскопии такие изменения могут имитировать клеточную атипию, некроз, разрыв стромы или инвазивный рост опухоли. Для профилактики используют острый нож, минимальное давление на материал, правильную фиксацию без предварительного сдавления и аккуратное размещение фрагментов в кассете.
Низкая температура при транспортировке может вызвать замедление аутолиза или, напротив, повреждение ткани при замораживании; нарушение свойств формалина приводит преимущественно к недостаточной фиксации, а не к механическому размозжению. Поэтому локализация дефекта на этапе макроскопической обработки имеет принципиальное значение для правильной интерпретации гистологической картины.
| Этап обработки | Типичная причина повреждения | Морфологические проявления | Профилактика |
|---|---|---|---|
| Вырезка | Сдавление пинцетом, грубое удерживание, тупой нож, чрезмерное давление при рассечении | Размозжение ткани, деформация клеток и ядер, разрывы стромы, ложная атипия | Острый инструмент, щадящая техника, минимальное количество манипуляций |
| Транспортировка | Замораживание, перегрев, длительная задержка доставки, механическая тряска | Кристаллы льда, аутолиз, отслойка эпителия, фрагментация ткани | Соблюдение температурного режима, быстрая доставка, достаточный объем фиксатора |
| Фиксация | Недостаточный объем формалина, длительная задержка помещения материала в фиксатор, неправильное соотношение ткани и фиксатора | Аутолиз, слабая окраска, нечеткость ядерных и цитоплазматических структур | 10% нейтральный забуференный формалин, соотношение фиксатор: ткань около 10: 1 |
| Обезвоживание и проводка | Слишком быстрое обезвоживание, пересушивание, перегрев, нарушение концентрации спиртов | Сморщивание, уплотнение, ломкость и деформация тканевых фрагментов | Контролируемая проводка, соблюдение времени и концентрации реагентов |
| Заливка в парафин | Неправильная ориентация материала, перегрев парафина, наличие остаточной влаги | Нарушение ориентации эпителия, пустоты, плохое прилегание ткани к парафину | Корректная ориентация, оптимальная температура парафина, полное обезвоживание |
| Микротомия | Тупой нож, неправильный угол наклона, слишком твердый или мягкий блок | Складки, полосы, компрессия среза, ступеньки , разрывы и вибрационные дефекты | Правильная настройка микротома, качественный нож, охлаждение или размягчение блока |