2) низкой температуре
3) комнатной температуре (+)
4) в использованном фиксаторе
Фиксацию биологического материала обычно проводят при комнатной температуре, поскольку в этих условиях химическое взаимодействие фиксирующего раствора с тканями протекает достаточно быстро и равномерно. Наиболее часто используют 10% нейтральный забуференный формалин, который стабилизирует белки, прекращает аутолиз и предупреждает развитие гнилостных изменений. Для качественной фиксации кусочки ткани должны быть небольшими, а объём фиксатора — примерно в 10–20 раз превышать объём материала.
Предварительное обмывание водой нежелательно: оно может вызвать набухание, вымывание растворимых компонентов и морфологические артефакты. Низкая температура замедляет диффузию фиксатора и химические реакции, поэтому не является стандартным условием рутинной фиксации; охлаждение применяют лишь в отдельных специальных методиках. Использованный фиксатор также непригоден, поскольку его концентрация снижается, он загрязняется и хуже обеспечивает сохранность тканевых структур.
| Параметр | Рекомендация | Значение |
|---|---|---|
| Температура | Комнатная, если методика не предусматривает иное | Обеспечивает оптимальную скорость фиксации |
| Фиксатор | Свежий 10% нейтральный забуференный формалин | Сохраняет белковые структуры и предупреждает аутолиз |
| Соотношение объёмов | Фиксатор должен превышать объём ткани в 10–20 раз | Предотвращает быстрое истощение раствора |
| Размер фрагмента | Толщина обычно не более 3–5 мм | Ускоряет проникновение фиксатора в глубину ткани |
| Срок начала фиксации | Как можно быстрее после взятия материала | Снижает риск аутолиза и посмертных изменений |
| Предварительное промывание водой | Не проводят без специального указания методики | Предупреждает набухание и вымывание тканевых компонентов |