2) материал плохо промыт
3) материал плохо укреплен
4) материал плохо обезвожен
Правильный ответ — 1) парафиновый блок медленно охлаждался при заливке. При медленном охлаждении в парафине формируются крупные кристаллы и неоднородная кристаллическая структура. Такой блок становится хрупким, при движении микротома легко крошится, а срез получается фрагментированным и неровным. После заливки парафиновый блок следует охлаждать быстро и равномерно, предпочтительно на охлаждаемой поверхности.
Недостаточное обезвоживание или неполная пропитка парафином обычно приводят к мягкости блока, сжатию, разрыву или выпадению тканевого фрагмента из парафина. Плохая фиксация повреждает морфологическую сохранность ткани, а недостаточное промывание может вызвать артефакты окраски, но не является наиболее вероятной причиной крошения самого парафинового блока.
| Ошибка на этапе проводки или заливки | Основной механизм | Типичный вид дефекта | Профилактика |
|---|---|---|---|
| Медленное охлаждение парафина | Образование крупных кристаллов и неоднородной структуры парафина | Хрупкий блок, крошение при резке, фрагментированные срезы | Быстрое равномерное охлаждение на холодной поверхности |
| Недостаточное обезвоживание | Сохранение воды препятствует полноценному просветлению и пропитыванию парафином | Мягкий блок, сжатие ткани, разрывы и плохое формирование ленты | Контроль времени обезвоживания с учетом размера и плотности материала |
| Недостаточная пропитка парафином | Парафин не замещает полностью просветляющий агент и не проникает в ткань | Ткань выпадает из блока, срез деформируется или рвется | Адекватные температура, время и вакуумная инфильтрация при необходимости |
| Недостаточная фиксация материала | Аутолиз и потеря структурной целостности клеток и межклеточного вещества | Морфологические артефакты, рыхлость ткани, неравномерное окрашивание | Своевременная фиксация в 10% нейтральном забуференном формалине |
| Недостаточное промывание | Сохранение остатков фиксатора, солей или реагентов | Фон, артефакты окраски, локальные преципитаты | Стандартизированное промывание и соблюдение протокола проводки |