- Фельген (+)
- Шпильмейер
- Браше
- Гомори
Правильный ответ — реакция Фёльгена. Это гистохимический метод специфического выявления ДНК. После мягкого кислотного гидролиза в молекуле дезоксирибозы образуются альдегидные группы, которые взаимодействуют с реактивом Шиффа. В результате ядерный хроматин и хромосомы окрашиваются в малиново-пурпурный цвет. Интенсивность окраски может использоваться для ориентировочной оценки содержания ДНК в клетках.
Принципиальная особенность реакции Фёльгена заключается в её относительной специфичности к дезоксирибозе, поэтому основная окраска локализуется в ядрах, хромосомах и участках конденсированного хроматина. Метод Шпильмейера применяют преимущественно для выявления миелиновых оболочек, метод Браше — для дифференциального выявления РНК и ДНК, обычно с использованием пиронина и метилового зелёного, а методы Гомори предназначены для выявления отдельных ферментов, фосфатов кальция и некоторых компонентов соединительной ткани.
В практической гистологии реакцию Фёльгена используют при изучении клеточного цикла, плоидности клеток, количественных изменений ядерной ДНК, а также в морфологических исследованиях опухолей. Отсутствие этапа кислотного гидролиза или его неправильная продолжительность может привести к слабой либо неспецифической окраске, поэтому метод требует строгого соблюдения протокола.
| Метод | Основной объект выявления | Механизм или окрашивающий компонент | Типичная область применения |
|---|---|---|---|
| Фёльгена | ДНК, хроматин, хромосомы | Кислотный гидролиз, образование альдегидных групп дезоксирибозы, реактив Шиффа | Оценка содержания ДНК, плоидности и состояния хроматина |
| Браше | Преимущественно РНК и ДНК | Метиловый зелёный окрашивает ДНК, пиронин — РНК | Оценка содержания РНК в цитоплазме и ядрышках |
| Шпильмейера | Миелиновые оболочки нервных волокон | Специальная окраска липидных компонентов миелина | Исследование нервной ткани и демиелинизирующих изменений |
| Гомори | Ферменты, фосфаты кальция, ретикулярные волокна и другие структуры | Осаждение окрашенного продукта ферментативной реакции или солей металлов | Гистохимическое выявление ферментов и компонентов тканей |