- 96% спирт
- в холодную воду (+)
- 70% спирт
- в теплую воду
Верный вариант — в холодную воду. После заполнения заливочной формы расплавленным парафином её быстро охлаждают, чтобы парафин равномерно затвердел и сформировал плотный блок. Это позволяет сохранить правильную ориентацию тканевого фрагмента, предупредить его смещение и обеспечить получение качественных серийных срезов на микротоме.
Холодная вода ускоряет отведение тепла от формы; в лабораторной практике также используют охлаждаемую металлическую поверхность или специальную охлаждающую плиту. Тёплая вода, напротив, замедляет кристаллизацию парафина и может привести к деформации блока. 70% и 96% этиловый спирт применяют на этапах обезвоживания материала, но после парафиновой заливки они не используются, поскольку не выполняют функцию охлаждения и могут нарушить свойства парафинового блока.
| Этап | Среда или реагент | Основная цель | Практическое значение |
|---|---|---|---|
| Фиксация | 10% нейтральный забуференный формалин | Стабилизация структуры тканей | Предупреждает аутолиз и гнилостные изменения |
| Обезвоживание | Этанол возрастающей концентрации | Удаление воды из ткани | Подготавливает материал к пропитыванию парафином |
| Просветление | Ксилол или другой валидированный заменитель | Замещение спирта органическим растворителем | Обеспечивает совместимость ткани с парафином |
| Пропитывание | Расплавленный парафин | Заполнение тканевых пространств парафином | Придаёт материалу необходимую механическую плотность |
| Заливка и охлаждение | Форма с парафином, холодная вода или охлаждаемая поверхность | Формирование твёрдого парафинового блока | Фиксирует ориентацию ткани и облегчает микротомию |