- низкая окружающая температура
- чрезмерное уплотнение материала
- высокая окружающая температура
- плохое пропитывание парафином (+)
При недостаточном пропитывании парафином ткань внутри блока не приобретает однородной механической прочности. В микропрепарате сохраняются участки с остаточной водой, спиртом, просветляющим агентом или воздушными включениями, поэтому парафин не заполняет межклеточные пространства и плохо фиксируется на поверхности материала. При движении ножа микротома такой участок отделяется от парафиновой основы, крошится или рвётся вместо формирования полноценной ленты срезов.
Нарушение обычно связано с неполной дегидратацией, недостаточным просветлением, слишком коротким временем инфильтрации, использованием перегретого или уже изменённого парафина, а также с чрезмерно крупными фрагментами ткани. Низкая температура делает блок хрупким, а высокая — чрезмерно мягким и склонным к компрессии; однако именно неполная парафиновая инфильтрация является основной причиной отделения тканевого материала от парафина. Для профилактики необходимо соблюдать последовательность фиксации, обезвоживания, просветления и пропитывания, контролировать температуру расплавленного парафина и обеспечивать достаточную экспозицию ткани.
| Нарушение при проводке | Механизм | Внешний вид среза | Коррекция |
|---|---|---|---|
| Недостаточная дегидратация | Сохранение воды препятствует проникновению просветляющего агента и парафина | Разрывы, отслоение ткани, рыхлость блока | Увеличить время обработки в спиртах, контролировать их концентрацию |
| Недостаточное просветление | Остаточный спирт смешивается с парафином и нарушает его проникновение | Неоднородность блока, выпадение фрагментов при резке | Заменить просветляющий реагент, выдержать ткань необходимое время |
| Плохое пропитывание парафином | Парафин не заполняет тканевые пространства и не обеспечивает механическую поддержку | Отделение материала от парафина, крошение, неполучение ленты | Продлить инфильтрацию, использовать свежий парафин, при необходимости применить вакуум |
| Слишком высокая температура | Парафин размягчается, возможно повреждение и пересушивание ткани | Сжатие, размазывание, деформация среза | Соблюдать рабочую температуру, близкую к температуре плавления парафина |
| Слишком низкая температура | Парафиновый блок становится чрезмерно твёрдым и хрупким | Трещины, фрагментация, неровный срез | Скорректировать охлаждение блока и условия резки |