2) удаление солей кальция
3) удаление воды из тканей
4) получение тонких равномерных срезов с исследуемого объекта
Правильный ответ — 1. Фиксация стабилизирует тканевые структуры и предотвращает аутолиз — ферментативное самопереваривание клеток после прекращения кровообращения. Кроме того, она замедляет гнилостное разложение, сохраняет взаимное расположение клеток и межклеточного вещества, а также закрепляет многие морфологические и гистохимические компоненты. Наиболее распространённый фиксатор в рутинной гистологии — 10%-ный нейтральный забуференный формалин, соответствующий примерно 4%-ному раствору формальдегида.
Фиксация является начальным этапом проводки материала и должна выполняться своевременно, при достаточном объёме фиксатора и оптимальной толщине образца. Удаление солей кальция относится к декальцинации, удаление воды — к обезвоживанию спиртами, а получение тонких срезов выполняется после заливки материала в парафин или другой среду с использованием микротома. Следовательно, эти процессы не являются основной целью фиксации, хотя входят в общий комплекс гистологической обработки.
| Этап обработки | Основная цель | Типичные средства или оборудование | Результат |
|---|---|---|---|
| Фиксация | Стабилизация тканевых структур, прекращение аутолиза и гниения | Нейтральный забуференный формалин, параформальдегид, глутаральдегид | Сохранение морфологии клеток и межклеточного вещества |
| Декальцинация | Удаление солей кальция из костной и минерализованной ткани | Растворы ЭДТА, муравьиной или азотной кислоты | Размягчение материала для последующей проводки и резки |
| Обезвоживание | Постепенное удаление воды из фиксированной ткани | Этиловый спирт возрастающей концентрации | Подготовка ткани к просветлению и заливке |
| Просветление | Замещение спирта веществом, совместимым со средой для заливки | Ксилол, толуол или безопасные заменители ксилола | Подготовка ткани к пропитыванию парафином |
| Заливка и микротомия | Получение тонких равномерных срезов | Парафин, кассеты, микротом, стальные или одноразовые лезвия | Срезы толщиной обычно около 3–7 мкм для световой микроскопии |