2) азотная кислота
3) 70% спирт
4) абсолютный спирт, хлороформ и ледяная уксусная кислота (+)
Классический фиксатор Карнуа состоит из абсолютного этилового спирта, хлороформа и ледяной уксусной кислоты в соотношении 6:3:1 соответственно. Он относится к коагулирующим фиксаторам: спирт и уксусная кислота быстро денатурируют белки, а хлороформ способствует проникновению раствора в ткань и экстракции липидов.
Фиксация раствором Карнуа хорошо сохраняет ядерный хроматин, нуклеиновые кислоты и гликоген, поэтому его применяют при цитологических и гистохимических исследованиях. Однако фиксатор вызывает обезвоживание, уплотнение и некоторое сморщивание материала; липиды при этом частично или значительно удаляются. Формалин, азотная кислота и 70% этанол в классический состав жидкости Карнуа не входят: они используются в других фиксирующих системах или на отдельных этапах проводки материала.
| Компонент | Примерная доля | Основное действие | Гистологическое значение |
|---|---|---|---|
| Абсолютный этиловый спирт | 60% или 6 частей | Обезвоживание и коагуляция белков | Хорошо фиксирует клеточные структуры, но может вызывать сморщивание ткани |
| Хлороформ | 30% или 3 части | Растворение липидов и улучшение проникновения фиксатора | Способствует уплотнению материала, но ухудшает сохранность жировых компонентов |
| Ледяная уксусная кислота | 10% или 1 часть | Фиксация ядерных структур и нуклеопротеинов | Повышает контрастность ядер, может способствовать набуханию отдельных компонентов |
| Формалин | Не входит | Альдегидная фиксация с образованием поперечных связей белков | Используется самостоятельно, чаще в виде нейтрального забуференного формалина |
| Азотная кислота | Не входит | Сильное кислотное воздействие | Не применяется как компонент классического раствора Карнуа |
Следовательно, правильная комбинация — абсолютный спирт, хлороформ и ледяная уксусная кислота; стандартное соотношение компонентов составляет 6:3:1.