2) обезвоживание
3) промывание (+)
4) удаление спирта
Правильный ответ: 3) промывание. После завершения фиксации гистологический материал промывают, чтобы удалить из тканей остатки фиксирующего раствора и продукты его взаимодействия с клеточными структурами. Особенно важен этот этап после применения водных фиксаторов: неполное удаление фиксатора может нарушить последующее окрашивание, вызвать образование осадка или привести к появлению артефактов.
После промывания материал последовательно обезвоживают в спиртах возрастающей концентрации, затем проводят просветление, пропитывание и заливку в парафин. Поэтому обезвоживание является следующим крупным этапом проводки, но при принятой в тесте последовательности ему предшествует промывание. Заливка в парафин выполняется значительно позже, а удаление спирта происходит во время просветления, когда спирт замещают веществом, совместимым с парафином.
| Этап обработки | Основная цель | Типичные реагенты | Значение для качества препарата |
|---|---|---|---|
| Фиксация | Сохранение прижизненной структуры тканей и прекращение аутолиза | 10% нейтральный забуференный формалин | Предотвращает распад клеток и тканевых компонентов |
| Промывание | Удаление остатков фиксирующего раствора | Проточная вода, буферные растворы | Снижает риск осадков, артефактов и дефектов окрашивания |
| Обезвоживание | Замещение воды спиртом | Этанол возрастающей концентрации | Подготавливает ткань к просветлению и пропитыванию парафином |
| Просветление | Удаление спирта и замещение его средой, совместимой с парафином | Ксилол или его заменители | Обеспечивает проникновение расплавленного парафина в ткань |
| Пропитывание и заливка | Формирование плотного блока для получения тонких срезов | Расплавленный парафин | Позволяет выполнить качественную микротомию |
Последовательность: фиксация → промывание → обезвоживание → просветление → пропитывание парафином → заливка в блок.