2) F = Е~стандарта~ : С~стандарта~
3) F = C~опыта~ х Е~опыта~
4) F = C~стандарта ~ : Е~стандарта~ (+)
Правильный ответ: 4) F = Cстандарта: Eстандарта.
Калибровочный коэффициент применяют в фотометрических методах лабораторной диагностики для перевода измеренной оптической плотности в концентрацию определяемого аналита. Его рассчитывают как отношение известной концентрации стандартного раствора Cстандарта к полученной для него оптической плотности, или экстинкции, Eстандарта: F = Cстандарта / Eстандарта. Такой расчёт основан на прямой пропорциональности между концентрацией вещества и оптической плотностью в пределах линейного диапазона фотометрического метода.
После определения фактора концентрацию аналита в исследуемой пробе рассчитывают по формуле Cопыта = F × Eопыта. Стандарт и исследуемый образец необходимо анализировать при одинаковых условиях: на одной длине волны, с одинаковым составом реакционной смеси, временем инкубации и оптической длиной кюветы. Ошибки при приготовлении стандарта, неправильное обнуление фотометра или выход оптической плотности за линейный диапазон приводят к систематическому искажению результата.
| Показатель | Обозначение | Формула или значение | Лабораторное значение |
|---|---|---|---|
| Концентрация стандартного раствора | Cстандарта | Заданная величина | Известная концентрация аналита, используемая для калибровки |
| Оптическая плотность стандарта | Eстандарта | Измеряется фотометром | Характеризует поглощение света стандартным раствором |
| Калибровочный коэффициент | F | F = Cстандарта / Eстандарта | Показывает, какая концентрация соответствует единице оптической плотности |
| Оптическая плотность исследуемой пробы | Eопыта | Измеряется фотометром | Используется для расчёта концентрации аналита в биоматериале |
| Концентрация аналита в пробе | Cопыта | Cопыта = F × Eопыта | Искомый количественный результат лабораторного исследования |
| Условие корректности расчёта | — | Линейная зависимость E от C | Измерения должны находиться в аналитическом диапазоне метода |
Таким образом, фактор получают делением концентрации стандарта на его оптическую плотность, а затем используют для количественного определения аналита в исследуемой пробе.