2) миграции частиц под действием электрического тока
3) увеличение концентрации фрагментов ДНК
4) взаимодействии антитела и антигена (+)
Правильный ответ: 4) взаимодействии антитела и антигена. Иммуноферментный анализ основан на специфическом связывании антигена с соответствующим антителом. Для регистрации образовавшегося иммунного комплекса используют антитело или антиген, конъюгированный с ферментом. После добавления субстрата фермент вызывает окрашенную реакцию, интенсивность которой измеряют фотометрически; она связана с концентрацией определяемого вещества.
В зависимости от методики ИФА может быть прямым, непрямым, сэндвич-методом или конкурентным. В клинической лабораторной диагностике с его помощью выявляют антитела, антигены, гормоны, цитокины, опухолевые маркеры и другие биологически активные соединения. Использование антител, меченных радиоизотопом, характерно для радиоиммунного анализа, а не для ИФА.
Миграция частиц в электрическом поле является основой электрофоретических методов, а увеличение количества фрагментов ДНК происходит при амплификации, например в полимеразной цепной реакции. Таким образом, ключевым этапом ИФА является специфическое иммунологическое взаимодействие антиген—антитело , а ферментная метка обеспечивает последующую визуализацию или количественную оценку результата.
| Метод | Основной принцип | Тип метки или регистрируемого сигнала | Примеры применения |
|---|---|---|---|
| ИФА | Специфическое взаимодействие антигена с антителом | Ферментная метка; изменение оптической плотности раствора | Определение антител, антигенов, гормонов, инфекционных маркеров |
| Радиоиммунный анализ | Конкурентное связывание антигена и антитела | Радиоизотопная метка и регистрация радиоактивности | Высокочувствительное определение гормонов и лекарственных веществ |
| Электрофорез | Разделение заряженных частиц в электрическом поле | Миграция компонентов и последующее окрашивание или детекция | Исследование белков сыворотки, гемоглобинов, нуклеиновых кислот |
| ПЦР | Многократная амплификация специфического участка ДНК | Флуоресцентный сигнал или визуализация продукта амплификации | Выявление возбудителей и генетических вариантов |