- уреаза
- холестеролоксидаза
- глюкозооксидаза (+)
- лактатдегидрогеназа
Правильный ответ: глюкозооксидаза. В ферментативном методе она катализирует окисление β-D-глюкозы кислородом с образованием глюконовой кислоты и перекиси водорода: глюкоза + O₂ → глюконовая кислота + H₂O₂. Количество образовавшейся перекиси водорода пропорционально концентрации глюкозы в исследуемом образце.
На практике чаще применяют глюкозооксидазно-пероксидазный метод (GOD-POD). Перекись водорода при участии пероксидазы окисляет хромогенную систему, вызывая появление окрашенного продукта; его оптическую плотность измеряют фотометрически. Интенсивность окраски прямо связана с концентрацией глюкозы. Метод используют для исследования сыворотки, плазмы, капиллярной крови и мочи, однако результат может зависеть от содержания аскорбиновой кислоты, билирубина, гемолиза и особенностей доступа кислорода.
Остальные перечисленные ферменты предназначены для определения других субстратов: уреаза расщепляет мочевину, холестеролоксидаза участвует в анализе холестерина, а лактатдегидрогеназа катализирует взаимопревращение лактата и пирувата. Поэтому они не являются специфическими ферментами данного варианта определения глюкозы.
| Фермент | Основной субстрат | Реакция или продукт | Основное лабораторное применение |
|---|---|---|---|
| Глюкозооксидаза | Глюкоза | Образование глюконовой кислоты и H₂O₂ | Ферментативное определение глюкозы, глюкозометрия |
| Пероксидаза | Перекись водорода | Окисление хромогена с образованием окрашенного продукта | Индикаторный этап GOD-POD-метода |
| Уреаза | Мочевина | Образование аммиака и карбамата | Определение мочевины в сыворотке и моче |
| Холестеролоксидаза | Холестерин | Окисление холестерина с образованием H₂O₂ | Ферментативное определение холестерина |
| Лактатдегидрогеназа | Лактат и пируват | Взаимопревращение лактата и пирувата с участием NAD⁺/NADH | Определение активности ЛДГ, оценка повреждения тканей |