2) 1 мм в кубе (+)
3) 80 мкм
4) 7 нм
Правильный ответ: 1 мм³.
Для электронной микроскопии биопсийный материал должен иметь минимальные размеры, обычно около 1 × 1 × 1 мм. Небольшой объём обеспечивает быстрое и равномерное проникновение первичного фиксатора, чаще глутарового альдегида, во всю толщу образца. Это необходимо для сохранения ультраструктуры клеток: мембран, митохондрий, эндоплазматической сети, рибосом и межклеточных контактов.
При использовании более крупных фрагментов центральные участки фиксируются медленно, вследствие чего развиваются аутолиз, набухание органелл и повреждение мембран. После первичной фиксации обычно проводят постфиксацию тетраоксидом осмия, обезвоживание и заключение в эпоксидную смолу. Значения 80 мкм и 7 нм характеризуют линейные размеры: 7 нм может соответствовать толщине ультратонкого среза, но не объёму исследуемого материала.
| Параметр | Типичное значение | Назначение | Практическое значение |
|---|---|---|---|
| Размер фрагмента ткани | Около 1 × 1 × 1 мм | Первичная подготовка материала | Обеспечивает полноценное проникновение фиксатора |
| Первичная фиксация | Глутаровый альдегид | Стабилизация белковых структур | Предотвращает аутолиз и деформацию органелл |
| Постфиксация | Тетраоксид осмия | Сохранение и контрастирование мембран | Улучшает визуализацию липидных компонентов |
| Толщина ультратонкого среза | Примерно 50–90 нм | Просвечивающая электронная микроскопия | Позволяет электронному пучку проходить через препарат |
| Слишком крупный образец | Например, 1 см³ | Непригоден для качественной фиксации | Вызывает артефакты и разрушение ультраструктуры |
Таким образом, ограничение объёма материала величиной 1 мм³ связано прежде всего с необходимостью максимально быстрого сохранения клеточной ультраструктуры.