2) Романовского
3) Нильсена
4) Пешкова (+)
Правильный ответ: 4) метод Пешкова. Это специальный дифференциальный способ окрашивания бактериальных эндоспор, позволяющий различить спору и вегетативную часть микробной клетки. Метод применяют прежде всего при исследовании спорообразующих бактерий родов Bacillus и Clostridium.
Плотные многослойные оболочки эндоспоры плохо пропускают обычные красители, поэтому препарат обрабатывают метиленовым синим по Лёффлеру с нагреванием. Повышение температуры облегчает проникновение красителя внутрь споры. После дополнительного окрашивания нейтральным красным или фуксином зрелые эндоспоры приобретают голубую окраску, молодые споры — тёмно-синюю, а цитоплазма вегетативных клеток — красную.
Метод Романовского преимущественно используют для исследования форменных элементов крови, некоторых простейших и внутриклеточных микроорганизмов. Окраска по Цилю–Нильсену предназначена для выявления кислотоустойчивых бактерий, прежде всего микобактерий. Следовательно, специфическим методом обнаружения эндоспор среди предложенных вариантов является именно окраска по Пешкову.
| Метод окрашивания | Основная диагностическая цель | Характерный результат | Типичные объекты исследования |
|---|---|---|---|
| Пешкова | Выявление бактериальных эндоспор | Споры — голубые или тёмно-синие; вегетативные клетки — красные | Bacillus, Clostridium |
| Романовского–Гимзы | Дифференциальная окраска клеток крови и некоторых микроорганизмов | Различные структуры приобретают синие, фиолетовые и розовые оттенки | Форменные элементы крови, плазмодии, риккетсии |
| Циля–Нильсена | Выявление кислотоустойчивых микроорганизмов | Кислотоустойчивые бактерии — красные; фон — синий | Mycobacterium tuberculosis и другие микобактерии |
| Грама | Разделение бактерий по строению клеточной стенки | Грамположительные — фиолетовые; грамотрицательные — розово-красные | Большинство клинически значимых бактерий |
Практический вывод: наличие внутриклеточных или свободно расположенных синих эндоспор на фоне красных вегетативных клеток подтверждает правильное выполнение окрашивания по Пешкову.