2) физиологическим раствором
3) дистиллированной водой
4) 70% этиловым спиртом
Правильный ответ: 1) 15% раствор уксусной кислоты. В судебно-медицинской цитологии такая обработка используется как этап подготовки вырезки из пятна: уксусная кислота разрыхляет органический субстрат, способствует высвобождению сперматозоидов и уменьшает белково-слизистый фон, что облегчает их обнаружение и морфологическую идентификацию. При соблюдении установленного времени воздействия клеточные структуры, включая головки сперматозоидов с ядерным материалом, могут быть использованы и для последующего молекулярно-генетического анализа.
Физиологический раствор не фиксирует материал и может способствовать вымыванию клеточных элементов. Дистиллированная вода вызывает гипотоническое повреждение клеток и также не обеспечивает надежной фиксации. 70% этиловый спирт обладает фиксирующими и обезвоживающими свойствами, однако в данной комбинированной методике он может ухудшать цитологическую оценку и не является предусмотренной средой для первичной обработки вырезки. Следует учитывать, что для выделения ДНК в лаборатории применяют валидированные протоколы, обычно включающие дифференциальный лизис с использованием детергентов и восстановителей, например дитиотреитола.
Таким образом, 15% уксусная кислота выбирается не как универсальный реагент для экстракции ДНК, а как специальная среда подготовки пятна спермы для сочетания цитологического исследования с последующим выделением генетического материала. В практической работе важно избегать длительной или чрезмерно интенсивной кислотной обработки, поскольку это может повредить ДНК; при наличии достаточного материала целесообразно разделять образец на цитологическую и молекулярно-генетическую части.
| Среда обработки | Основное действие | Оценка для данной методики |
|---|---|---|
| 15% раствор уксусной кислоты | Разрыхляет органический субстрат, способствует освобождению сперматозоидов и снижает белково-слизистый фон. | Правильный вариант при соблюдении времени и условий обработки. |
| Физиологический раствор | Мягкая водно-солевая среда для увлажнения или переноса биоматериала. | Не фиксирует клетки, возможна потеря сперматозоидов и снижение качества цитологического препарата. |
| Дистиллированная вода | Гипотоническая среда, вызывающая осмотическое повреждение клеточных структур. | Непригодна для надежной фиксации и сохранения морфологии сперматозоидов. |
| 70% этиловый спирт | Фиксирует и обезвоживает биологический материал. | Может применяться в других протоколах фиксации, но не является выбором для данного этапа комбинированного исследования. |